細粒棘球絳蟲PCR試劑盒

Echinococcus granulosus

產(chǎn)品及特點

細粒棘球絳蟲（Echinococus granulosus）成蟲寄生在犬科食肉動物， 幼蟲（稱棘球蚴）寄生于人和多種食草類家畜，以及其它動物，引起一種嚴重 的人獸共患病，稱棘球蚴病或包蟲病（echinococcosis，hydatid disease， hydatidosis）。棘球蚴病分布地域廣泛。隨著世界畜牧資源的開發(fā)而不斷擴散， 現(xiàn)已成為性的公共衛(wèi)生問題。因此快速準確診斷細粒棘球絳蟲具有重要意 義。為此本公司基于 PCR 原理開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供寄生蟲 DNA 模板。

2. 根據(jù)細粒棘球絳蟲保守序列設(shè)計的專一性引物，與其他微生物無交叉反應(yīng)

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

細粒棘球絳蟲PCR試劑盒規(guī)格及成分

運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其 他試劑。 

自備試劑 樣品 DNA。

使用方法 一、樣品 DNA 的制備

1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽 性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?10μL 陽性對照的 1 千倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此 作為 PC。另外用水作為 NC。

2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)寄生蟲 DNA 提取 試劑盒兼容。 

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照，故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分： 

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)：

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。