（1）吸光度太高，一方面可能偏離朗伯比爾定律，吸光度變化不再呈線性關(guān)系；另一方面會導(dǎo)致吸光度變化不靈敏。因此，吸光度不宜太高。如果可以，盡量控制在1以下。
（2）構(gòu)成本底吸光度是樣品提取液含有在該波長產(chǎn)生強(qiáng)烈光吸收的其它物質(zhì)，或者在測定光吸收減少速率的反應(yīng)中，人為添加的底物在該波長下造成的光吸收。
（3）如果是前者造成的，那么可以通過用對照再次調(diào)零，把本底光吸收消除。
（4）如果是后者，那么只能接受?；蛘呖头纯茨芊駵p少底物濃度。不過，大家知道，對于酶來說，底物濃度通常要求≥10Km。
至于吸光度超過分光光度計(jì)測量范圍，通常是兩種情況，紫外應(yīng)該用石英比色皿，錯用了玻璃比色皿；或者比色皿不透光一面對著光源。其它情況還包括比色皿太臟，或者提取液本身顏色太深等。